実験解説の部屋
「手順はわかるけど、原理はよくわからない…」
そんなモヤモヤを解消するための、実験原理や理論の解説コーナーです。
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DNA抽出
プラスミド抽出の「3つの試薬」の役割、言えますか?
アルカリSDS法の原理を完全解剖。Solution I, II, IIIがそれぞれ何をしているのか解説します。
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PCR
PCRの「魔のバンド」はなぜ出る?非特異増幅の正体
狙ったバンドが出ない、変な場所にバンドが出る…。アニーリング温度とプライマーダイマーの関係について。
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クローニング
ブルー・ホワイトセレクションの仕組み
なぜコロニーが青くなるの?LacZとα相補性、IPTGとX-galの役割をイラストで解説。
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電気泳動
電気泳動のバンドが「笑う」のはなぜ?
アガロースゲルの濃度と分離能の関係、電圧を上げすぎると起こるスマイリング現象について。
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精製
エタノール沈殿 vs カラム精製
DNAはどうやって回収されているのか?水への溶解性と、塩+エタノールによる沈殿の原理。
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タンパク質発現
「発現誘導」って細胞の中で何が起きてるの?
LacオペロンとIPTGによる誘導の仕組み。プロモーターの強さやリプレッサーの働きについて。
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酵素
制限酵素が「予定外の場所」を切ってしまう!?
スター活性の原因と対策。グリセロール濃度や反応時間が及ぼす影響とは。
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抗生物質
抗生物質の使い分けと耐性菌のメカニズム
アンピシリン、カナマイシン、クロラムフェニコール。それぞれの作用機序と耐性遺伝子の働き。
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培養
OD600とは何か?大腸菌の濁度と増殖曲線
吸光度計で見ているのは「吸収」ではなく「散乱」。対数増殖期を見極めるコツ。
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合成生物学
Gibson Assembly vs Golden Gate
次世代クローニングの原理比較。エキソヌクレアーゼ法とType IIS制限酵素法の使い分け。
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